二級生物安全柜工作原理為空氣經預過濾器過濾后，由風機送入靜壓箱，經高效過濾器過濾后進入操作區(qū)。操作區(qū)左右及后部墻體均為負壓風道，使工作區(qū)與外部環(huán)境形成氣幕及箱體雙層隔離。同時工作區(qū)被負壓包圍，保證樣品不發(fā)生泄漏。操作區(qū)的氣流由于排風風機的作用，通過負壓風道經排風高效過濾器過濾后排入廢氣通道。

　　二級生物安全柜開機前準備：

　　1、提起前窗很小的高度，打開外風機。

　　2、確認進氣口有氣流以及聽覺感受到外風機正常工作后，進一步提高前窗到工作高度，以日光燈接通開啟為標準。

　　3、對柜內進行必要的清潔，主要是擦拭，區(qū)域包括工作臺面，側壁，背板等部位。以去除可能存在的灰塵和碎削物質，以保障實驗過程中樣品污染可能性的降低以及給予濾膜必要的保護。調整擱手架高度到適宜（一般調整后可以以后沿用），杜絕實驗過程袖管擋住前部進風口。

　　4、實驗過程中需要用到的物品的放入，如果需要接通電源的設備，先接在柜內插座上。放入的物品呈橫向排列，避免縱向排列時產生交叉污染。

　　5、從液晶屏幕上觀察，當E數(shù)值大于1260后，可以打開內風機。

　　6、預熱完畢后，液晶屏幕顯示E/D/Air Safe（Fail）說明安全柜工作狀態(tài)，AIR SAFE時說明機器狀態(tài)良好。確認目前機器狀態(tài)處于正常模式還是維護模式，做適當切換。

　　7、機器在當前狀態(tài)運行3-5分鐘左右以確保機器處于穩(wěn)定狀態(tài)，進入實驗過程。